中文摘要
麻黄碱是麻黄属植物的特征性的化学成分之一，除麻黄属外，麻黄碱还见在于半夏，白背黄花稔等常见的药材中。含麻黄碱药材除有宣肺止咳，燥湿化痰、止吐，消炎、祛风除湿的药用价值外，其药材相关的其他草本产品，尤其是麻黄草，还大量滥用于食品补充剂、运动兴奋剂及毒品中，非法走私案件时有发生。为加强对含麻黄碱药材的管理，规范含麻黄碱药材的经营秩序，防止流入非法制毒渠道，本研究采用DNA条形码及Taqman探针技术鉴定含麻黄碱药材，为其合理监管、科学流通提供帮助。
本课题收集国内分布的常见的含麻黄碱药材共18个物种的201份样品，提取其总DNA，采用药用植物通用的条形码ITS2与psbA-trnH，并扩增ITS2序列及psbA-trnH序列，通过比较筛选适合鉴定含麻黄碱药材的候选条形码，并开展Taqman qPCR。得到如下结论：
1 采用经过改良的试剂盒法，成功从18个物种201份样品中提取到药材的DNA。获得ITS2序列及psbA-trnH序列数分别为175、136。Ephedra组、Araceae组、Sida组的ITS2序列数分别为113、53、9，psbA-trnH序列数分别为118、9、9。
2 通过比较候选条形码的扩增率，相似性搜索法及建树法的物种鉴定率，发现psbA-trnH序列在半夏等药材中的扩增率较低，而ITS2序列的扩增率、物种鉴定率均高于psbA-trnH序列，因此，ITS2序列适合作为含麻黄碱药材的候选条形码。而由于麻黄属Ephedra的psbA-trnH序列中存在碱基缺失，可用于Ephedra属的物种鉴定。
3 基于ITS2序列的差异，针对含麻黄碱药材的基原植物的分类设计出三组特异性强的引物及Taqman探针组合，其灵敏度可达0.00503 ng/μL，验证了Taqman qPCR技术具有特异性强，快速准确以及灵敏度高的优点。
综上所述，本课题基于ITS2序列的DNA条形码技术与Taqman qPCR技术可实现含实现快速、准确、灵敏地鉴定含麻黄碱类药材，旨在对麻黄碱类药材的合理市场流通与科学监管提供参考。
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